技術(shù)說(shuō)明：

雙分子熒光互補（Bimolecular Fluorescence Complementatioin，BiFC）技術(shù)是一種基于熒光蛋白片段重組發(fā)光的活細胞內蛋白互作可視化檢測技術(shù)。其核心優(yōu)勢在于可在原生細胞環(huán)境中直接觀(guān)察目標蛋白的相互作用，是分子生物學(xué)領(lǐng)域研究蛋白互作的核心工具之一，廣泛應用于植物、動(dòng)物、微生物等多個(gè)研究體系。

BiFC技術(shù)是將完整的熒光蛋白拆分為兩個(gè)無(wú)熒光活性的N端片段（N-fragment）和C端片段（C-fragment）。實(shí)驗中，將兩個(gè)拆分的熒光蛋白片段分別與待測蛋白進(jìn)行融合表達：若兩個(gè)蛋白不存在相互作用，兩個(gè)熒光片段隨機分散在細胞內，無(wú)熒光產(chǎn)生；若兩個(gè)蛋白存在相互作用，其結合力會(huì )帶動(dòng)融合在其上的熒光片段相互靠近，觸發(fā)片段重組并形成活性熒光蛋白，通過(guò)熒光顯微鏡可觀(guān)察到特異性熒光信號。熒光信號的強度與蛋白互作的效率、穩定性呈正相關(guān)，且熒光的亞細胞定位即為蛋白互作發(fā)生的位置。

服務(wù)說(shuō)明：

1.載體選擇：1300YCE、1300YNE；

2.材料：客戶(hù)需提供基因登錄號或ORF序列；

3.周期：載體構建周期為7-10個(gè)工作日

應用場(chǎng)景：

1. 蛋白互作的直接驗證

2. 蛋白互作強度分析

3. 亞細胞定位與互作的關(guān)聯(lián)分析

結果交付：

1.重組載體質(zhì)粒/菌液一份；

2.項目結題報告（測序結果，重組載體圖譜）。